提取物致突变实验研究论文

提取物致突变实验研究论文

减小字体 增大字体 作者:管理员  来源:本站整理  发布时间:2010-03-19 19:15:03

  1 材 料

  1.1 药品与动物杜仲提取物主要成分绿原酸,张家界恒兴生物科技公司提供。昆明种小鼠购于湖南中医学院实验动物中心,批号:990218 。注射用环磷酰胺:上海华联制药有限公司,批号:030504。叠氮钠(NaN3):上海试剂一厂,批号:990706。鼠伤寒沙门氏菌株(TA97,TA98,TA100,TA102)购于中国农科院兽医药品监察所。

  1.2 主要仪器ES-C300A电子天平:湘仪天平仪器厂。组织匀浆器:北京玻璃仪器厂。

  2 方法与结果

  2.1 小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验小鼠60只,体重(28±2)g,雌雄各半,随机分为6组。杜仲提取物稀释液设为1.28,0.64,0.32,0.16 g/kg 4个剂量组,阴性对照为蒸馏水,两次灌胃给予受试物。阳性对照为环磷酰胺(CP)40 mg/kg体重,两次腹腔注射间隔24 h,第2次给受试物后6 h,颈椎脱臼处死动物。按国家标准[4]取骨髓制片,每只动物计数1 000个嗜多染红细胞,微核率以百分率表示。结果见表1。

  表1 杜仲提取物对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率实验(略)

  与阴性对照组比较,**P<0.01,△P>0.05;n=10

  由表1可知,实验组雌、雄小鼠微核发生率为0.39%~0.43%,阴性对照组为0.43%,阳性对照组为4.38%,实验组与阴性对照组比较,微核发生率均无差异显著性(P>0.05),阳性对照组与阴性对照组比较,差异性显著(P<0.01)。

  2.2 杜仲提取物对小鼠精子畸形的试验 雄性小鼠60只,体重(30~35)g,随机分为6组,实验组剂量为1.28,0.64,0.32,0.16 g/kg体重与阴性对照组(生理盐水),经口腔给予。阳性对照组用环磷酰胺40 mg/kg体重腹腔注射。各组1次/d,连续5 d给予受试物。于首次给药后第35天,颈椎脱臼处死小鼠,按纪云晶[5]方法制片。每组计数2 000个精子,计算其畸形率。结果见表2。

  表2 杜仲提取物对小鼠精子畸形的影响(略)

  与阴性对照组比较,**P<0.01,△P>0.05;n=10

  由表2可知,实验组小鼠的精子畸形率为7.6%~8.3%,阴性对照组为7.8% ,阳性对照组为71.8%,实验组与阴性对照组比较差异无显著性(P>0.05),阳性对照组与阴性对照组比较差异极显著(P<0.01)。

  2.3 Ames试验按Ames标准方法[6]对鼠伤寒沙门氏突变型菌株TA97,TA98,TA100,TA102进行增菌培养后进行鉴定,所采用的4个菌株特性均与Ames试验标准相符。在加与不加活化物的条件下进行平板掺入法试验。杜仲提取物用双蒸馏水稀释为 500,400,300,200 μg/皿4个剂量组,阳性对照为叠氮钠(NaN3)10 μg/皿,阴性对照为双蒸馏水100μg/皿,每个剂量组重复做2个平皿,结果见表3。

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